流式細胞儀能否辨別到種是一些藻類檢測工作者最關(guān)心的問題之一。而成像質(zhì)量的提高，可幫助我們觀測到鑒定相關(guān)的細節(jié)和高清晰度的內(nèi)部小結(jié)構(gòu)。

理論上，放大倍數(shù)越高，成像質(zhì)量越好，如40X或60X。 然而缺點是倍率越高景深越小，因此一些成像倍率高的設備通常采用非常窄的流動池，也就意味著你只能分析非常小的顆粒，因此，野外樣品（如自然海水等）需要將所有大粒徑的顆粒過濾掉。CytoBuoy經(jīng)過不懈努力，更新光學元件，實現(xiàn)在16X放大倍數(shù)下使用非常大的流動池呈現(xiàn)高質(zhì)量的圖像。新系統(tǒng)可設置僅在顆粒穿過相機焦平面時進行拍攝，這意味著不再有模糊照片形成的照片流阻礙。

關(guān)于CytoSense當前使用的超大流通池和放大倍數(shù)，CytoBuoy 公司CEO George B.J. Dubelaar 先生給了比較詳細的介紹：

樣品的過濾預處理

為防止流式細胞儀管路堵塞，大部分流式細胞儀都會標明客戶在分析樣品之前需要對樣品進行過濾預處理。而我們使用的濾膜過濾孔徑與實際通過的顆粒粒徑并非完全一致。實際上，如果你使用過濾孔徑為Xμm 的濾篩過濾樣品，一般來說自由通過的顆粒粒徑只有X的1/3。粒徑大于1/3Xμm 的顆粒會隨著過濾時間的增長越來越難自由通過濾篩。因此，通過的顆粒數(shù)量偏低且對濃度的評估不準確，因為接近Xμm大小的顆粒幾乎沒有通過。所以，使用非常粗略的方法可以推測，在儀器入口前對任何顆粒使用Xμm孔徑的篩網(wǎng)進行過濾，所得最大顆粒粒度的正確測定值僅為X的一半。假如設備要求樣品分析前必須經(jīng)過70μm 網(wǎng)篩過濾，這可能意味著其最佳分析粒徑為30-40μm。對于CytoSense, 我們建議采用1mm甚或1.2mm濾膜過濾以防堵塞。

圖像清晰度的關(guān)鍵還取決于光學透鏡的設計

我們通常認為成像質(zhì)量依賴于透鏡的放大倍數(shù)。有些成像流式細胞儀只有在40X和60X放大倍率下才能獲得好的照片，這種倍率下景深極窄和畫框尺寸非常小。對與野外樣品就會存在粒徑限制——最大照片畫框尺寸的20X倍率也只能分析120μm。CytoSense 具有16X 放大倍數(shù)，然而我們最新透鏡（專門為我們流式細胞儀定制設計）的光學設計非常優(yōu)秀，而且事實上聚焦的圖像的清晰度比我們的其他同類產(chǎn)品的20X放大倍率還要好。更重要的是，我們可以對所有大到直徑500um的顆粒進行高質(zhì)量成像。

分享一組測試照片，感受一下新版CytoSense實際的成像效果。結(jié)合散點圖，Silico-imaging詳細記錄細胞的全部光學信息，逐個掃描，不放過自然水體中的稀有藻種。

空星藻（Coelastrum.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
直鏈藻（Melosira）
顆粒直鏈藻極狹變種（Melosira granulata var angustissima）
角甲藻（Ceratium）
魚磷藻（Mallomonas）
根管藻（Rhizosolenia）
等片藻Diatoma
嚙蝕隱藻Cryptomons erosa
浮游動物